首先,多肽溶解性是多肽本身的性質(zhì),很難進(jìn)行改變,多肽的本身性質(zhì)如此,再合成也是沒有用的,無法改變其溶解性。多肽在水中的溶解性一般;
可以通過以下方法來增加多肽的溶解性
1調(diào)整溶液的PH助溶;
2 超聲助溶;
3 調(diào)整溶液溫度(≤30℃)助溶;
4 添加助溶劑(如DMSO,DMF等),建議先將肽溶于有機(jī)溶劑,再緩慢加入水或其它緩沖溶液。
5 對于堿性肽,建議用10%乙酸溶解,對于酸性肽,建議用10%NH4HCO3溶解。
每條客戶訂購的多肽我們在發(fā)貨前都經(jīng)過質(zhì)檢部門嚴(yán)格的檢驗(yàn)的,在國際公認(rèn)的多肽檢測標(biāo)準(zhǔn)上(MS和HPLC),我們都有出示檢測報(bào)告。
客戶實(shí)驗(yàn)失敗可以從頭檢查下實(shí)驗(yàn)流程,看看是不是哪里出現(xiàn)問題了,我們也可以在自己的專業(yè)領(lǐng)域給客戶提供一些幫助。
多肽的活性在實(shí)驗(yàn)中是沒有辦法保證的,這也是所有多肽公司都沒有辦法保證的。
我們多肽訂單合成之前最少核對三次,更不會(huì)出現(xiàn)故意更改氨基酸順序的行為。萬一出現(xiàn)投錯(cuò)氨基酸的問題,在質(zhì)譜中就會(huì)檢測出來。如果客戶仍然糾結(jié),可以將我們的原始記錄單拍照或復(fù)印后發(fā)給客戶。
多肽不是面粉,當(dāng)然會(huì)有味道的,我們的多肽體系是TFA鹽體系。TFA是三氟乙酸,有強(qiáng)烈刺鼻的酸味,但是在我們已經(jīng)完成的多肽產(chǎn)品上應(yīng)該是沒有味道的,如果有味道出現(xiàn)可能是因?yàn)榭蛻舻男蛄杏H水性較好,容易吸附水分,如果有吸潮現(xiàn)象出現(xiàn),可能會(huì)有少許酸味出現(xiàn)。鹽形式是必須存在的,不會(huì)影響客戶使用,但是如果客戶堅(jiān)持不用,可以考慮將樣品??退回,我們重新處理。
如果客戶拿到手的多肽已經(jīng)液化了,有兩種可能,一種是客戶訂購的多肽親水性太強(qiáng),雖然凍干后是白色粉末狀,但可能在郵寄過程中吸潮產(chǎn)生這種狀況,不會(huì)影響多肽的使用。但是客戶如果要保存很長時(shí)間或是糾結(jié)這個(gè)問題,客戶可以把多肽寄回,我們可以提供重新凍干服務(wù),注意:重新凍干和稱量都會(huì)有部分損失,建議還是直接溶解使用。還有一種可能就是客戶訂購的序列為短肽,如常見的二肽或三肽。這一類多肽可能出現(xiàn)無法凍干的現(xiàn)象。我們會(huì)提前告知客戶。
多肽的保存時(shí)間是有期限的,常規(guī)多肽在不使用的情況下低溫密封保存可能時(shí)間會(huì)長一點(diǎn)。所以客戶的多肽我們建議密封保存在-20——-80度且盡快使用。反復(fù)凍融也會(huì)影響多肽效果,建議客戶用多少稱量多少。
我們的多肽經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量把控,不會(huì)不合格的。因?yàn)槎嚯牡男再|(zhì),運(yùn)輸,保存,檢測條件不同,儀器差異等會(huì)造成部分序列檢測出現(xiàn)誤差,客戶可以把檢測報(bào)告發(fā)過來,我們發(fā)給技術(shù)人員分析問題解決問題。
任何物質(zhì)都無法做到百分百純的,多肽也一樣會(huì)有雜質(zhì)產(chǎn)生。這些雜質(zhì)已經(jīng)被我們的實(shí)驗(yàn)人員控制在最小范圍內(nèi)了,具體雜質(zhì)可能會(huì)是鹽類,殘基肽或是水分。定制肽段一般用于前期研究,大部分客戶定制純度都在95%或以上,已經(jīng)足夠進(jìn)行相對精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)了。
多肽是定制的產(chǎn)品,所以它跟當(dāng)時(shí)的溫度、濕度都有關(guān)系。例如:肽冬天的時(shí)候怎么做都做不出來,但是到春季夏季時(shí),很快就能合成出來。多肽本身就是一個(gè)定制的序列。存在著不可以預(yù)知的因素。
一般約10-15個(gè)氨基酸,當(dāng)然長一些免疫效果好一些,不過合成費(fèi)用也會(huì)增加。MAP多肽則希望長度在15aa以上,效果較好。另外,10aa以下的多肽免疫效果比較差。
一般而言,免疫用Peptide,70-85%即可。
(1)多肽中如果含有高比例的疏水性很強(qiáng)的氨基酸如和Leu,Val,IIe,Met,Phe和Trp,多肽很難溶解于水性溶液中或根本不可能溶解。這些氨基酸無論是純化或合成,都有可能有問題。
(2)一般情況下疏水性氨基酸的比例<50%,不能連續(xù)5個(gè)連續(xù)aa為疏水性,帶電荷的氨基酸的(正電荷K,R,H,N-terminus,負(fù)電荷D,E,C- terminus)的比例達(dá)到20%,在多肽的N或C短如果能增加極性氨基酸,也可以改善溶解性。
含有Cys, Met,或Trp的多肽難以合成,同時(shí)難以獲得高純度的產(chǎn)品。主要因?yàn)檫@些基團(tuán)不穩(wěn)定,易氧化。這些多肽的使用和儲(chǔ)存都需要特別注意,避免反復(fù)開啟蓋子。
多肽合成與引子合成有比較大的區(qū)別,不能合成的引子很少,但是不能合成的多肽經(jīng)常有。如Val,Ile,Tyr,Phe,Trp,Leu,Gln,和Thr這些氨基酸比鄰或重復(fù)時(shí),多肽鏈在合成過程中不能完全舒展溶解,合成效率下降。以下幾種情形,合成效率和產(chǎn)物的純度都比較低,如:重復(fù)Pro,Ser-Ser,重復(fù)Asp,4個(gè)連續(xù)Gly等.
我們提供的多肽是粉末狀,一般為灰白色,組成不同,多肽粉末的顏色有差異,多肽一般長期保存需要避光保存,并應(yīng)保存在-20度,短期可以保存在4度。可以短時(shí)間的話是以室溫運(yùn)輸。